PH值是菌種發(fā)酵過程中最直接、最靈敏反映過程變化的參數(shù)之一,每一種菌體在生長或代謝過程中都有其最適PH值。目前包括筆者廠家在內(nèi)的多數(shù)生產(chǎn)廠家使用的PH測量系統(tǒng)均為2100e變送器搭配465復(fù)合電極,如何確保PH值在線測量過程中的可靠性,對PH電極進行科學(xué)合理的標定是至關(guān)重要的。標定PH電極的過程其實就是用兩點確定一條直線的原理確定該PH電極的實際工作曲線,然后將其輸入給變送器,使變送器能正確的計算出pH值。實際上現(xiàn)在所謂的標定是指對變送器的標定,電極本身并沒有記憶功能。不過最新生產(chǎn)的光學(xué)智能PH電極由于在電極內(nèi)部置入了芯片,真正實現(xiàn)了對PH電極的標定。


PH電極的標定


先用蒸餾水沖洗電極,用軟紙吸干水份,放入PH7.0(或6.86)的緩沖溶液中,等待一分鐘后按CAL鍵、輸入代碼1100,按確認鍵后開始標定,直至出現(xiàn)CAL2后取出電極,用蒸餾水沖洗后用軟紙吸干水份,放入PH4.0的緩沖溶液中,等待一分鐘后按確認鍵確認后,等待標定結(jié)束。如果標定結(jié)果不在工藝要求范圍,用PH模擬器進行模擬,查出原因后重新進行標定,直至滿足要求。


注意:標定時零點和斜率都在要求范圍內(nèi),sensoface顯示平臉而不是笑臉的原因大多為響應(yīng)時間長,此時需適當(dāng)延長等待時間,不要將電極放入緩沖溶液后就開始標定,一定要按標定程序耐心等待一分鐘。

標定結(jié)果


表征pH電極的參數(shù)有以下兩個:(第三個是膜阻抗)斜率90%---105%;零點-10mV---10mV;每個pH相當(dāng)?shù)膍V就是截距,在不同溫度下都有標準的截距數(shù),同溫下實際截距與標準截距的比值就是斜率。梅特勒電極對斜率的要求是90%---105%。而且在PH電極使用過程中我們發(fā)現(xiàn),如果標定后斜率為88%的話,這個誤差用PH模擬器也校正不過來。


零點的意義


我們可以這樣理解,58mV相當(dāng)于1個PH值,即5.8mV為0.1PH,假如標定后零點為10mV,差不多就相當(dāng)于0.2的PH的偏差;如果標定后零點為30mV,那么就相當(dāng)于從培養(yǎng)開始PH顯示值就和實測值相差0.52個PH,當(dāng)然這還不算消罐對PH電極性能產(chǎn)生的影響。


如果對PH電極的標定結(jié)果不能同時滿足這兩個要求,請用PH模擬器進行模擬,查出原因后重新進行標定,直至滿足要求。


注意:在培養(yǎng)過程中,一旦發(fā)現(xiàn)取樣用臺式PH計測量值與在線測量值值相差較大,請用PH模擬器模擬,如果模擬結(jié)果不好,對變送器進行零點校正以修復(fù)偏差;如果模擬結(jié)果較好,請檢查并校準臺式PH計后取樣復(fù)測,原則上不允許更改PH6.80的正常培養(yǎng)時的設(shè)定值。


PH電極保養(yǎng)


在電極使用過程中,一定要注意消罐溫度對PH電極的影響。當(dāng)滅菌溫度超過130度后,電極將發(fā)生不可逆損壞。


(1)將電極浸泡在相應(yīng)的電解液中。


(2)避免負壓,防止料液倒灌入?yún)⒈润w系中,正確的維護確保測量的精度和穩(wěn)定性


(3)一般性污染:用水、0.1mol/lNaOH或0.1mol/lHCl清洗電極數(shù)分鐘。


(4)油脂或有機物污染:用丙酮或乙醇清洗電極數(shù)秒鐘。


(5)硫化物污染(隔膜發(fā)黑):用9892清洗液處理(見5所附使用說明)。使用方法:將電極頭部浸泡在溶液中(隔膜應(yīng)沒入溶液中),直到隔膜無色(至少1小時),然后浸泡在3M的KCl中過夜,完全沖洗,重新校準后可使用。


(6)蛋白質(zhì)污染(隔膜發(fā)黃):用9891清洗液處理(見5所附使用說明)。用法:將電極頭部放入溶液中,確保隔膜浸沒在溶液中(至少1個小時)。然后用蒸餾水沖洗,重新校準。


(7)護套保壓:對于需要加壓的465和InPro2000系列電極使用時應(yīng)注意經(jīng)常觀察護套上的壓力表讀數(shù)。原則上護套內(nèi)的壓力應(yīng)比反應(yīng)器內(nèi)壓力高1.5Bar以上。


PH模擬器的使用


將電纜線接入PH模擬器,將模擬器旋至7.0Low,觀察變送器讀數(shù),正常應(yīng)為7.0,按conf鍵,輸入2222后查看7.0Low、9.0Low、4.0Low電位值進一步確認PH變送器與電纜線的漂移量,正常讀數(shù)分別為0mv、-116mv、175mv,允許偏差3mv。若偏差較大,對變送器與電纜線進行零點校正以修復(fù)偏移量。


校零步驟:將電纜線接入PH模擬器,將模擬器旋至7.0Low后,按CAL輸入1001并確認,變送器顯示7.0,按確認鍵確認后,自動進行零點校正。


結(jié)論


總之,PH值的檢測對菌種的發(fā)酵過程來說是一個有很重要的影響因素,發(fā)酵水平的提升,對PH電極的要求也越來越高。因此,PH電極在菌種發(fā)酵行業(yè)的合理應(yīng)用值得我們更加深入細致的研究。