【摘要】：目的:以多巴胺(DA)、腎上腺素(E)和去甲腎上腺素(NE)為檢測對象，研究能活化被5-羥色胺(5-HT)、NADH、組氨等物質污染的碳纖維微電極的方法;在抗污染的基礎上，通過電流校正的方法達到定量檢測5-羥色胺的目的;用氧化還原法或納米材料電沉積法修飾碳纖維微電極(CFME)進一步提升微電極對兒茶酚類神經遞質的檢測靈敏度，并將上述檢測方法應用于生物樣本的高靈敏檢測。

方法:

(1)采用電沉積法將氧化石墨烯修飾到已被5-羥色胺(5-HT)毒化的CFME表面，用循環伏安法(CV)和差分脈沖伏安法(DPV)研究了多巴胺(DA)在該修飾電極上的電化學行為，考查了該電極的電化學性能，并優化氧化石墨烯的電沉積時間及電壓，達到最佳的活化效果。

(2)將制備好的CFME置于1.0×10~(-4)mol/L5-羥色胺溶液中循環伏安掃描10圈后，測定電極在鐵氰化鉀、多巴胺等電活性溶液中的循環伏安以及差分脈沖圖的峰電流變化，采用火焰灼燒法對被5-羥色胺毒化的電極進行活化，定義活化后電極與原電極在鐵氰化鉀溶液中的峰電流之比為校正因子，對電極的活性面積進行校正，用校正后的氧化峰電流繪制5-羥色胺測定的工作曲線。

(3)采用電流-時間曲線法在純水中對已被5-羥色胺(5-HT)毒化的CFME進行再生活化，通過掃描電鏡(SEM)以及X射線能譜分析法(EDS)表征電極表面結構及形貌，探討該法活化再生碳纖維電極的機理。

(4)在超純水中采用恒電位電沉積的方法，在CFME表面修飾含氧基團(RO);再采用恒電位法在傳感界面負載聚二烯二甲基氯化銨(PDDA)為保護劑制備的納米金粒子(AuNPs)，制得RO/PDDA-AuNPs/CFME修飾電極。利用掃描電子顯微鏡對修飾前后CFME的表面形貌進行了表征，采用循環伏安法及差分脈沖法探討了修飾電極在DA溶液中的電化學行為。

(5)采用納米金修飾碳纖維微電極，修飾電極對蘆薈多糖具有良好的電催化活性，通過在活體蘆薈植株凝膠中插入該修飾電極，對不同生長條件下蘆薈植株中的蘆薈多糖進行動態監控，從而評價蘆薈多糖對植株應激外界環境的含量變化。

結果:

(1)實驗結果表明，在20 mmol/L，pH為7.2的Tris-HCl緩沖溶液中，使用氧化石墨烯修飾的再生電極對多巴胺、去甲腎上腺素具有良好的電化學響應。在優化條件下，利用DPV法進行測定，DA的氧化峰電流與其濃度在0.1~100μmol/L呈良好的線性關系，檢測限達0.1μmol/L。

(2)實驗結果表明，校正后的5-羥色胺氧化峰電流與其濃度在1.0×10~(-6)~2.0×10~-44 mol/L范圍內呈現良好的線性關系，線性回歸方程為I(nA)=0.2073 C(μmol/L)+0.3074，相關系數R~2=0.9962，用該方法對5-羥色胺樣品濃度進行了測定，回收率達到98.0%~102.4%。該方法操作簡單，重現性好，有望用于生物樣品中5-羥色胺的檢測。

(3)實驗結果表明，CFME表面的絕緣膜可以通過恒電位電沉積法去除。采用電流-時間曲線法于純水中向CFME施加1.5V的初始電壓，經電活化處理的CFME在神經遞質中的氧化還原峰電流顯著增加。實驗結果表明，電極活化歸因于電化學氧化刻蝕除去電極表面絕緣層，此外，在電化學處理過程中，電極表面形成含氧官能團(如羥基，羧基，羰基，內酯)，提高了碳纖維電極表面的潤濕性和親水性，促進多巴胺在電極表面的聚集。利用DPV法進行測定，DA的氧化峰電流與其濃度在1.0×10~(-7)-1.0×10~-44 mol/L呈良好的線性關系，檢測限為3.1×10~-88 mol/L。再生的CFME非常穩定并且具有優異的靈敏度和選擇性，可用于監測復雜生物微環境中的神經遞質。

(4)實驗結果表明:在20 mmol/L pH 7.0的Tris-HCl緩沖溶液中，復合修飾膜RO/AuNPs-PDDA對DA具有顯著的電催化氧化活性。在優化條件下，采用差示脈沖伏安技術對多巴胺進行定量分析，實驗結果表明DA的氧化峰電流與其濃度在1×10~(-7)-5×10~(-5)mol/L范圍內呈良好的線性關系，線性相關系數R~2=0.9912，檢測限為3.3×10~(-8)mol/L(S/N=3)。該修飾方法重現性好，電極穩定性佳，制備方便，可廣泛應用于生物樣品中DA的高靈敏分析。

(5)納米金粒子修飾后的CFME和金電極對蘆薈儲水凝膠組織中蘆薈多糖的電催化活性增強，不同環境下蘆薈植株中蘆薈多糖含量的動態水平變化具有顯著的統計學差異，能作為衡量蘆薈光合作用強度的一個指標。